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博华生物提供ELISA检测技术服务
更新时间:2012-08-08      阅读:3036

服务内容
    凡购买本司目录任何一种检测试剂盒(酶联免疫、免疫组化、放射免疫),您只需将需要检测的动物(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Pig,Monkey……)种类和检测指标(介素类、因子类)及标本数量(48T/96T)通知我司业务人员即可。在接到客户标本当日起,一周内将检测报告交到客户手中!(由于标本须低温保存,故标本代测服务只限北京本地客户。)

质量保证
    检测用所有试剂全部都为进口试剂,适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本,灵敏度*,多年专业酶免服务,我们保证对所售任何产品一概负责到底,每一份实验结果都真实可靠!

注意事项
在收集标本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。我们提倡新鲜标本尽早检测,对收集后当天就进行检测的标本,及时储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,请造模取材后,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差,蛋白极易降解,直接影响实验质量,所以避免反复冻融。代测放免标本的客户取材前须向我司销售人员索要说明书,具体操作注意事项请与我司技术人员沟通。

液体类标本
    包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
*血清
    室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
*血浆
    应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
*尿液
    用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
*细胞培养上清
    检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
*组织标本
    切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。



 

                          ELISA方法简介
    1.包被抗原:稀释液pH 9.6 碳酸盐缓冲液,多肽浓度2ug/ml,0.1ml/孔,4ºC过夜,洗净。
    2.1%BSA (pH 9.6 碳酸盐缓冲液) 封闭,0.1ml/孔,37ºC1h,洗净。
    3.稀释抗血清(可稀释不同浓度) 0.1ml/孔,37ºC 30分钟,洗净。
    4.稀释辣根过氧化物每标记的二抗 0.1ml/孔,37ºC 40分钟,洗净。
    5.显色
    A液:四甲基联苯胺10mg 溶于DMF1ml中,再用pH5.0柠檬酸缓冲液稀释100倍.
    B液:5ul双氧水加蒸馏水12.5ml 。
    终止液:2N硫酸
    A液、B液各一滴,比光显色10分钟,终止液一滴。
    6.450nm 波长 测OD值

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